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    上海研域生物常見細胞培養(yǎng)操作方法步驟

    發(fā)布時間: 2024-04-29  點擊次數(shù): 491次

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    常見細胞
    培養(yǎng)方法:

    1.細菌污染

    細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。

    培養(yǎng)細胞受細菌污染后,會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。污染后細胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,圓脫落死亡。


    2.真菌污染

    真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中常見的一種,常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。

    培養(yǎng)細胞受真菌污染后,可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,有的散在生長,培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。

    真菌污染后,細胞生長變慢,但后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。


    3.支原體污染

    支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的微生物,小直徑0.2μm,一般過濾除菌無法去除它,光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu)。開始不易發(fā)現(xiàn),能在偏堿條件下生存,對有抗藥性。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間。

    培養(yǎng)細胞受支原體污染后,部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢,部分細胞變圓,從瓶壁脫落。但多數(shù)細胞污染后無明顯變化,或略有變化,若不及時處理,還會產(chǎn)生交叉污染。


    4.病毒污染

    組織細胞培養(yǎng)過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產(chǎn)生病毒污染。目前,從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。


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